双荧光素酶转染是一种常用的基因编辑技术,可以将DNA片段导入到细胞中,使其表达目标基因。
转染步骤通常包括细胞培养、质粒构建、质粒DNA提取和纯化、电穿孔或化学转染、细胞培养、观察和分析转染效率等。
其中,质粒DNA提取和纯化非常重要,需要选择合适的DNA纯化方法,如DNA插入或克隆,酶切等。
电穿孔和化学转染则是将质粒DNA导入到细胞内的关键步骤,需要注意选择合适的转染条件和浓度,以达到最佳转染效果。
最后,需要观察和分析细胞内的转染效率和目标基因表达情况。
双荧光素酶(Dual-Luciferase)是一种重要的酶标记技术,利用荧光素酶和反式荧光素酶的发光反应,测试对目标基因表达的调控作用。
其原理是将目标基因的启动子序列与荧光素酶(FLuc)和反式荧光素酶(RLuc)基因连成双重报告系统,分别加入FLuc基因、RLuc基因和生物材料并采取测量荧光的方法分析FLuc和RLuc两个酶的活性差异,从而评估目标基因启动子的活性。
此技术具有灵敏度高、稳定、准确、快速等特点,广泛用于基因表达研究和药物筛选等领域。
双莓乳酪派是一款结合了酸甜口感和丰富口感的甜点。以下是制作双莓乳酪派的基本步骤:
### 材料:
1. **派皮**:
- 低筋面粉:150克
- 无盐黄油:60克
- 糖粉:30克
- 鸡蛋:1个
- 盐:少许
2. **乳酪馅**:
- 奶油奶酪:200克
- 糖粉:50克
- 鸡蛋:2个
- 淡奶油:100毫升
- 香草精:几滴
3. **双莓**:
- 蓝莓:100克
- 草莓:100克
- 糖粉:适量(用于装饰)
### 步骤:
#### 制作派皮:
1. **面团制作**:将黄油切成小块,与低筋面粉、糖粉和盐混合,用手搓成面包屑状。
2. **加入蛋液**:加入鸡蛋,混合均匀,揉成面团。
3. **松弛**:将面团放在保鲜膜中,压扁后放入冰箱松弛30分钟。
4. **擀面**:将松弛好的面团擀成比派盘稍大的圆形。
5. **铺盘**:将面皮铺在派盘上,用叉子在底部扎孔,防止烘烤时鼓起。
#### 制作乳酪馅:
1. **奶酪软化**:将奶油奶酪室温软化,加入糖粉,用打蛋器打至顺滑。
2. **加入蛋液**:分次加入鸡蛋,每次都要充分混合。
3. **加入淡奶油和香草精**:加入淡奶油和香草精,搅拌均匀。
#### 组装派:
1. **填充乳酪馅**:将乳酪馅倒入派皮中。
2. **摆放双莓**:将蓝莓和草莓洗净去蒂,摆放在乳酪馅上。
#### 烘烤:
1. **预热烤箱**:将烤箱预热至170摄氏度。
2. **烘烤**:将派放入烤箱,烘烤约30-35分钟,直到派皮金黄,乳酪馅凝固。
#### 装饰:
1. **撒上糖粉**:在派冷却后,撒上适量糖粉作为装饰。
### 提示:
- 烘烤时间和温度可能根据烤箱型号和性能有所不同,建议根据实际情况调整。
- 双莓可以根据个人口味替换为其他水果。
现在,您可以根据这些步骤尝试制作双莓乳酪派。祝您制作愉快!