PCR溶解曲线的制作通常涉及以下步骤1：
准备标准品并进行稀释。通常需要制备5到6个不同浓度的梯度，稀释倍数一般选择5倍或10倍。
将稀释后的标准品作为模板进行实时荧光定量PCR(Real Time PCR)反应，以获得各个标准品的Ct值（循环阈值）。
利用Ct值与起始模板浓度的对数值之间的线性关系，制作标准曲线。这一步骤通常由仪器自动完成，无需人工操作。
评价标准曲线的优劣主要通过两个指标：相关系数(R²)和斜率。理想的相关系数应大于0.98，越接近1表明直线性越好，定量越准确。斜率反映PCR扩增效率，理想值在0.8到1.2之间，越接近1表明扩增效率越理想。
PCR探针法和染料法是两种常用的基因检测方法，它们在原理和应用方面有一些区别。
PCR探针法是一种通过PCR技术检测特定DNA序列的方法。它使用两个引物，在PCR反应中扩增目标DNA序列，同时还加入一种探针。这种探针通常标记有荧光染料，当PCR反应中的目标DNA序列与探针完全匹配时，探针被酶切产生荧光信号，可以通过荧光检测仪器进行定量检测。
染料法是一种通过染色剂检测DNA或RNA的方法。它通常使用荧光染料或比色剂对DNA或RNA进行染色，通过观察染色结果来判断有无目标序列。染料法不需要进行PCR扩增，因此可以直接检测样品中的DNA或RNA。
在应用方面，PCR探针法常用于定量检测特定DNA序列的含量，例如在基因表达研究中，可以通过PCR探针法检测目标基因的表达水平。染料法通常用于检测DNA或RNA的存在与否，例如在分子生物学实验中，可以通过染料法检测PCR产物的纯度或分离和鉴定DNA或RNA条带。
PCR试剂的配制方法：首先测定所需物质的重量或体积，然后将其溶解或稀释至所需浓度。主要涉及的试剂包括：DNA模板、引物、dNTP混合物、聚合酶和缓冲液。注意：聚合酶和dNTP混合物需储存于-20℃以下。在配制PCR反应体系前应严格遵守无菌条件，并注意反应体系中各成分的质量和体积，避免污染或误差。