要制作细菌档案,需要首先了解不同种类细菌的特征和功能,然后按照分类体系建立档案目录。
档案内容应包括科属名、形态特征、生存环境、传播途径、疾病诱因、防治方法等信息,并附上图片、图表等辅助资料。
此外,为了保障档案的准确性和全面性,还应研究相关文献资料,参考权威数据来源,充分搜集细菌样本及相关实验数据,确保档案具有科学性和实用性。
选择细菌染色剂时,需要考虑实验需求和染色效果。常用的细菌染色剂包括革兰染色液、美兰染色液、姬姆萨染色液等。这些染色液各具特点,革兰染色液可用于鉴别革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,美兰染色液则对肠道内细菌有较好的着色效果,姬姆萨染色液适用于对寄生虫、真菌等的染色。因此,在选择细菌染色剂时,需要根据实验目的和要求进行选择,以达到最佳的染色效果。同时,需要注意使用方法和注意事项,避免对实验结果造成影响。
1.细菌涂片标本的制作
(1)涂片:取洁净载玻片一张,用玻璃铅笔于玻片上划个直径1.5cm左右的圆圈。用接种环在圆圈内各加1环生理盐水。接种环灭菌后,挑取细菌少许在盐水中磨匀,呈轻度混浊。涂好的菌膜大小一般以1cm2左右为宜。每次取菌前后注意将接种环灭菌。如果是液体培养物可直接涂抹于洁净的载玻片上。
(2)干燥:涂片最好在室温下自然干燥,或将标本面向上,置于酒精灯火焰高处慢慢烘干,切不可在火焰上烧干。
(3)固定:细菌的固定常用火焰加热法,即将上述已干的涂片在酒精灯火焰中通过3次。固定的目的在于杀死细菌,并使菌体与玻片粘附牢固,染色时不致于被染液和水冲掉,同时固定可凝固细胞质,改变细菌对染料的通透性。
2.细菌涂片标本的染色
(1)初染:将结晶紫染液加于制好的涂片上,染色 1min,用细流水冲洗,甩去积水。
(2)媒染:加卢戈碘液作用1min,用细流水冲洗,甩去积水。
(3)脱色:滴加95%酒精数滴,摇动玻片数秒钟,使均匀脱色,然后斜持玻片,再滴加酒精,直到流下的酒精无色为止(约0.5min),用细流水冲洗,甩去积水。
(4)复染:加稀释石炭酸复红染0.5min,用细流水冲洗,甩去积水。
待标本片自干或用吸水纸吸干后,在涂片上滴加香柏油,置油镜下观察。
结果判定:被染成紫色的细菌为革兰阳性菌;被染成红色的细菌为革兰阴性菌。