目前没有科学验证过最准确的方法，但可以根据基因遗传和基因型来推测。
八哥的性别决定于X、Y染色体的配对情况，如果是XY，就是雄性；如果是XX，就是雌性。
因此可以通过基因测序和基因型分析来估计八哥的性别，但这种方法成本较高。
另外，也可以通过望眼法或听声判断等传统方法进行性别分辨，但准确率有限。
八哥鸟可以通过以下方法辨别公母：
第一、可以从羽毛颜色分辩。
幼年期雄性八哥的羽毛黑亮，而雌性羽毛较暗。成年后雄性尾部无白色毛，雌性尾部有白毛。
第二、尾巴的形状、泄殖腔形状分辨。雄性八哥尾巴呈V字型，泄殖腔突起；而雌性尾巴分散，泄殖腔平坦。
通过观察八哥鸟的生殖器，以此来正确的区分八哥鸟的公母，是最准确的方法。雌鸟生殖器较雄鸟稍平坦，周围松散地长着一圈小羽毛;雄鸟生殖器呈小圆柱形突起，突起顶端长有束状的小羽毛。