PCR探针法和染料法是两种常用的基因检测方法，它们在原理和应用方面有一些区别。
PCR探针法是一种通过PCR技术检测特定DNA序列的方法。它使用两个引物，在PCR反应中扩增目标DNA序列，同时还加入一种探针。这种探针通常标记有荧光染料，当PCR反应中的目标DNA序列与探针完全匹配时，探针被酶切产生荧光信号，可以通过荧光检测仪器进行定量检测。
染料法是一种通过染色剂检测DNA或RNA的方法。它通常使用荧光染料或比色剂对DNA或RNA进行染色，通过观察染色结果来判断有无目标序列。染料法不需要进行PCR扩增，因此可以直接检测样品中的DNA或RNA。
在应用方面，PCR探针法常用于定量检测特定DNA序列的含量，例如在基因表达研究中，可以通过PCR探针法检测目标基因的表达水平。染料法通常用于检测DNA或RNA的存在与否，例如在分子生物学实验中，可以通过染料法检测PCR产物的纯度或分离和鉴定DNA或RNA条带。
PCR探针法和染料法是PCR技术中常用的两种检测方法，它们在检测靶标序列时的原理和应用略有不同。
1. PCR探针法：PCR探针法基于PCR技术，通过引入一种特定的探针分子来检测目标序列的扩增过程。在PCR反应中，引物与模板DNA结合并扩增，同时添加一种特定设计的受体分子（如探针分子）。探针分子通常包含一个与目标序列互补的序列，以及一个与特定检测方法相关联的标记物（如荧光染料或荧光抑制剂）。当PCR反应进行时，如果目标序列存在，探针分子会与之结合并释放出标记物，导致荧光信号的增强或抑制，从而实现目标序列的检测与定量。
2. 染料法：染料法是一种直接检测PCR扩增产物的方法，而不需要引入特定的探针分子。在PCR反应中，特定的引物与目标序列结合并扩增，扩增产物可以被某些DNA染料（如SYBR Green）直接结合并产生荧光信号。这种染料会与产物中的双链DNA结合，当DNA双链解旋时，染料会释放出信号。染料法可以实现目标序列的定性分析，但由于没有特定的探针用于区分非特异性扩增产物，可能产生一定的假阳性结果。
因此，PCR探针法需要设计和合成特定的探针分子，可以实现目标序列的定量分析，并具有较高的特异性和准确性；而染料法是一种简单直接的检测方法，便于操作，但可能存在较高的假阳性结果。选择哪种方法应根据实验需求、样本特性和所需结果的准确性进行选择。
PCR溶解曲线的制作通常涉及以下步骤1：
准备标准品并进行稀释。通常需要制备5到6个不同浓度的梯度，稀释倍数一般选择5倍或10倍。
将稀释后的标准品作为模板进行实时荧光定量PCR(Real Time PCR)反应，以获得各个标准品的Ct值（循环阈值）。
利用Ct值与起始模板浓度的对数值之间的线性关系，制作标准曲线。这一步骤通常由仪器自动完成，无需人工操作。
评价标准曲线的优劣主要通过两个指标：相关系数(R²)和斜率。理想的相关系数应大于0.98，越接近1表明直线性越好，定量越准确。斜率反映PCR扩增效率，理想值在0.8到1.2之间，越接近1表明扩增效率越理想。